【苯甲脒-瓊脂糖凝膠 6B】參數(shù)說明_使用方法

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       苯甲脒-瓊脂糖凝膠 6B主要應(yīng)用于蛋白、多肽、多糖的分離、分子量測定等，本文重點為您講苯甲脒-瓊脂糖凝膠 6B參數(shù)說明，使用方法及其他咨訊，本司的瓊脂糖凝膠系列特別多，包含有：肝素-瓊脂糖凝膠 H.P. ，-瓊脂糖凝膠 4B，-瓊脂糖凝膠 H.P. ，ConA-瓊脂糖凝膠 4B，藍色-瓊脂糖凝膠 CL-6B，更多系列請上海遠慕生物，我們將竭誠為您服務(wù)。
　　中文名：苯甲脒-瓊脂糖凝膠 6B
　　英文名：Benzamidine Sepharose 6B
　　供應(yīng)商：上海遠慕
　　基質(zhì)：6%高度交聯(lián)瓊脂糖凝膠
　　規(guī)格：25mg、100mg
　　操作溫度：4-40℃
　　zui大流速：300cm/h
　　性狀：白色膠體
　　保存溫度：4-8℃
　　瓊脂糖凝膠6B分離范圍：10,000-4 ×106
　　類型：凝膠過濾填料,凝膠層析介質(zhì)
　　用途：親和層析介質(zhì)
　　應(yīng)用：蛋白、多肽、多糖的分離、分子量測定等

　　【苯甲脒-瓊脂糖凝膠 6B】參數(shù)說明_使用方法
　　1、乙醇浸泡：在室溫下，將干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小時，并不斷攪拌以保證凝膠溶脹，用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干;
　　2、無鹽水浸泡：室溫下，在無鹽水中充分溶脹24小時，間隙攪拌，以保證凝膠的溶脹，然后;
　　3、鹽酸浸泡：在常溫下再用0.2NHCl浸泡12小時，間隙攪拌，濾干，水洗只中性;
　　4、將溶脹好的凝膠脫氣后(真空抽濾或超聲波)根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi)，注意保持濕態(tài)裝柱，并避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層;
　　5、上樣前平衡層析柱至少3-5個柱體積直到記錄儀基線變得平穩(wěn)為止(流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值);
　　6、凝膠過濾的上樣量一般為5%的柱床體積，我們建議初次上樣控制在1-2%的床體積，視分離情況可以調(diào)整;脫鹽時上樣量可以達到20%的柱床體積，柱高的選擇也與分離要求相關(guān)，柱高控制在40-50cm以下，過高的凝膠層會引起較大的反壓，應(yīng)當(dāng)盡可能避免;難分離物質(zhì)要有一定柱高和流速控制，脫鹽時高徑比為5：1即可;
　　7、洗脫方法：可以用無鹽水，也可以采用上柱時的緩沖液洗脫;在上柱Buffer中加入NaCl等梯度洗脫或鹽梯度洗脫也可以分離純化;
　　8、在位清洗(CIP)凝膠使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床內(nèi)沉淀的及頑固殘留的蛋白;方法是以40cm/h用1M氫氧化鈉反向洗四個柱體積，再以至少三個柱體積平衡緩沖液再生。
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