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• 氣相色譜法（GC）：
  • 原理：通過極性毛細管柱將順、反式脂肪酸分離并測定。GC法是我國國標和AOCS標準中使用較多的方法，具有高靈敏度和高分離度的特點。
  • 步驟：樣品經(jīng)過甲酯化處理后，使用長100m的氰丙基硅氧烷柱（如SP 2560或CP Sil 88）進行分離，反式異構(gòu)體在順式異構(gòu)體前流出。
  • 特點：適用于人工反式脂肪酸的檢測，近年來離子液體色譜柱（如SLB-IL111）的引入進一步提高了分離效果。
    
• 紅外光譜法（IR）：
  • 原理：利用非共軛反式雙鍵在紅外966 cm?1處有最大吸收峰的特性進行測定，峰面積與濃度呈線性關(guān)系。
  • 步驟：將油脂中的脂肪酸進行甲酯化處理后，在900-1050 cm?1波數(shù)范圍內(nèi)進行紅外光譜分析。
  • 特點：快速方便，適用于測定5%以上反式脂肪酸的油樣。衰減全反射傅里葉變換紅外光譜法（ATR-FTIR）及負二階導數(shù)法能解決共軛雙鍵、游離羧基和甘油羥基的干擾，測到含量<1%的反式脂肪酸。
    
• 銀離子色譜法（Ag+-TLC/Ag+-HPLC）：
  • 原理：Ag+對雙鍵的絡合強度隨雙鍵數(shù)而增強，隨鏈長而減弱，據(jù)此可分析脂肪酸的順、反異構(gòu)體。
  • 步驟：Ag+-TLC將順、反式脂肪酸分離成不同譜帶，用溶劑萃取后再定量；Ag+-HPLC則直接用于順、反式不飽和脂肪酸的分離。
  • 特點：適用于天然反式脂肪酸的檢測，尤其是乳脂中復雜的共軛反式脂肪酸成分。Ag+-HPLC相比Ag+-TLC具有更高的分離度和操作便捷性。
    
• 氣相色譜質(zhì)譜法（GC-MS）：
  • 原理：結(jié)合氣相色譜的分離能力和質(zhì)譜的定性能力，對反式脂肪酸進行準確測定。
  • 步驟：樣品經(jīng)過甲酯化處理后，使用氣相色譜進行分離，質(zhì)譜檢測器進行定性定量分析。
  • 特點：具有較寬的檢測范圍和較高的檢測水平，且不會降解目標分析物。適用于復雜樣品中反式脂肪酸的檢測。