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標(biāo)題: 沒有厭氧培養(yǎng)箱怎么進(jìn)行厭氧培養(yǎng)？ [打印本頁]

作者: 勝秋科學(xué)儀器 時(shí)間: 2025-7-3 13:51
標(biāo)題: 沒有厭氧培養(yǎng)箱怎么進(jìn)行厭氧培養(yǎng)？
如果沒有厭氧培養(yǎng)箱，可以采用以下幾種替代方法進(jìn)行厭氧培養(yǎng)：
一、厭氧罐法
原理：利用鈀催化劑催化氫氣和氧氣反應(yīng)生成水，配合產(chǎn)氣袋釋放氫氣和二氧化碳。
操作步驟：
將接種后的培養(yǎng)基放入?yún)捬豕蕖?br /> 加入產(chǎn)氣袋（含硼氫化鈉、碳酸氫鈉等），注入少量水觸發(fā)產(chǎn)氣。
密封罐體，37℃培養(yǎng)24-48小時(shí)。
優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便，成本低，適用于常規(guī)厭氧菌（如梭菌屬）。
二、真空置換法
原理：通過抽真空后充入無氧混合氣體（如N?:CO?:H?=85:10:5），重復(fù)3-4次置換罐內(nèi)氣體。
適用場(chǎng)景：實(shí)驗(yàn)室中需快速建立低氧環(huán)境的小規(guī)模培養(yǎng)。
三、Hungate滾管技術(shù)
原理：培養(yǎng)基煮沸除氧后持續(xù)通入無氧氣體（N?/CO?），使用預(yù)還原的厭氧試管，以注射器分裝并快速密封，通過滾管機(jī)旋轉(zhuǎn)使培養(yǎng)基均勻凝固成薄層。
應(yīng)用：嚴(yán)格厭氧菌（如產(chǎn)甲烷古菌）的分離與純培養(yǎng)。
四、焦性沒食子酸法
原理：焦性沒食子酸在堿性條件下與氧氣反應(yīng)生成焦性沒食子橙。
操作步驟：
在培養(yǎng)皿蓋內(nèi)放置焦性沒食子酸粉末和碳酸氫鈉（質(zhì)量比1:10）。
滴加少量水后迅速密封培養(yǎng)皿，靜置培養(yǎng)。
局限：僅適合短時(shí)培養(yǎng)（<24小時(shí)），氧氣吸收量有限。
五、硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基法
原理：培養(yǎng)基中添加硫乙醇酸鈉（0.05%-0.1%），通過巰基（-SH）維持低氧化還原電位。
特點(diǎn)：適用于兼性厭氧菌（如大腸桿菌）的梯度氧培養(yǎng)，液體培養(yǎng)基中可形成氧濃度梯度。
六、刃天青指示劑法
原理：添加刃天青（Resazurin，0.0001%），通過顏色變化（無色→粉紅）實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)氧氣殘留。
七、共培養(yǎng)法
原理：將需氧菌（如枯草芽孢桿菌）與目標(biāo)厭氧菌共培養(yǎng)，利用前者快速消耗氧氣。
應(yīng)用：模擬自然共生環(huán)境，研究微生物互作。
八、厭氧手套箱
原理：預(yù)抽真空后充入混合氣體，循環(huán)凈化至氧含量<5 ppm。
操作流程：
通過空氣鎖傳遞樣品，箱內(nèi)完成接種、觀察等操作。
優(yōu)勢(shì)：可長(zhǎng)期維持無氧環(huán)境，適合嚴(yán)格厭氧菌（如擬桿菌屬）的高通量實(shí)驗(yàn)。
九、改良燭缸法
原理：通過燃燒白蠟燭在燭缸系統(tǒng)中產(chǎn)生4-5%的二氧化碳，并瞬間降低密封缸內(nèi)的氧氣水平。
優(yōu)點(diǎn)：是一種敏感且成本效益高的替代方法，適用于資源有限的環(huán)境。
十、硅膠管替代培養(yǎng)法
原理：使用硅膠管替代傳統(tǒng)方法，更有效地研究土壤甲烷循環(huán)。
十一、玻璃瓶密封法
原理：將商業(yè)MRS培養(yǎng)基加入玻璃瓶中，通入二氧化碳?xì)怏w后密封，用于乳酸菌的分離。
優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)單可行，適用于乳酸菌的分離。
這些方法可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體需求和條件選擇使用，以實(shí)現(xiàn)厭氧培養(yǎng)的目的。

作者: 五仁月餅 時(shí)間: 2025-10-22 01:47
漲知識(shí)了，感謝分享！

作者: 9549872678@6 時(shí)間: 2025-12-1 12:16
樓上的分析很有道理，讓我對(duì)這個(gè)問題有了新的認(rèn)識(shí)。

作者: 花好月圓 時(shí)間: 4 天前
樓主的經(jīng)驗(yàn)很寶貴，謝謝分享。

作者: 打爆狗頭 時(shí)間: 4 天前
這個(gè)觀點(diǎn)很有深度，值得思考。

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